ELISA試劑盒中抗體有包被抗體和酶標(biāo)抗體,這兩種抗體是一種抗體,前者沒有酶標(biāo),后者用酶進(jìn)行了符號(hào). NCM-ELISA一般有一抗和二抗,這兩種抗體不一樣,前者(一抗)一般是鼠抗體或兔抗體,沒有酶標(biāo),相對(duì)應(yīng)的二抗一般是羊抗鼠或羊抗兔抗體,用酶進(jìn)行符號(hào).也有用馬大規(guī)模備抗體的.
確保ELISA試劑盒安全性的方法:
1.防止直接觸摸終止液和底物A、B。一旦觸摸到這些液體,請(qǐng)趕快用水沖洗。
2.試驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或運(yùn)用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
ELISA試劑盒的樣品收集、處理及保存方法:
1.血清-----操作過程中防止任何細(xì)胞影響。運(yùn)用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地別離。
2.血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3.細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.安排勻漿-----將安排參加適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5.保存------假如樣品不當(dāng)即運(yùn)用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,防止反復(fù)冷凍。盡可能的不要運(yùn)用溶血或高血脂血。假如血清中很多顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱凍結(jié)。應(yīng)在室溫下凍結(jié)并確保樣品均勻地充沛凍結(jié)。
ELISA試劑盒的操作注意事項(xiàng):
1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,運(yùn)用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟掉,不行保存。
2.試驗(yàn)中不必的板條應(yīng)當(dāng)即放回包裝袋中,密封保存,防止蛻變。
3.不必的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前運(yùn)用。
4.運(yùn)用一次性的吸頭防止交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),防止運(yùn)用帶金屬部分的加樣器。
5.運(yùn)用干凈的塑料容器配置洗滌液。運(yùn)用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充沛拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反響孔中吸水。
TDS-ELISA是三抗體ELISA,第三級(jí)的抗體是將信號(hào)級(jí)聯(lián)放大. 以上三種是比較常見的,還有其他一些試劑盒,可參考免疫學(xué)的內(nèi)容.
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