試劑
?。?) 包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液): NaHCO3 1.59克 NaHCO3 2.93克 加蒸餾水至1000ml (2) 洗滌緩沖液(PH7.4PBS):0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4·12H2O 2.9克 NaCl 8.0克 KCl 0.2克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加蒸餾水至1000ml ?。?) 稀釋液: 牛血清白蛋白(BSA) 0.1克 加洗滌緩沖液至100ml 或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。 ?。?) 終止液(2M H2SO4): 蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。 ?。?) 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸): 0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml 0.1M檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml 加蒸餾水50ml。 ?。?) TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液: TMB(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml 底物緩沖液(PH5.5) 10ml 0.75%H2O2 32μl ?。?) ABTS使用液: ABTS 0.5mg 底物緩沖液(PH5.5) 1ml 3%H2O2 2μl ?。?) 抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。 ?。?) 正常人血清和陽性對照血清。
器材
(1) 聚苯乙烯塑料板(簡稱酶標(biāo)板)40孔或96孔,ELISA檢測儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。 ?。?) 小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。 ?。?) 4℃冰箱,37℃孵育箱。
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